300091 UE Übung III A - Molekularbiologische Laborarbeiten (2009W)

Im Rahmen des Praktikums sollen grundlegende molekularbiologische Techniken erlernt und selbständig durchgeführt werden. Die Durchführung erfolgt anhand ausgewählter Beispiele in unterschiedlichen Modellorganismen (E.coli, Hefe, Pflanzen).
Tecniken: Klonierung bestimmter Gene (inklusive PCR Amplifikation) und Expression in E. coli, Nachweis des Proteins mittels Westernblott Analyse. ncRNA, Northern Blot, Isolierung eines Genes, Markierung und Verwendung beim Southern Blot. Gene in Hefe- und Pflanzenexpressionsvektoren; Hefe-Zwei-Hybrid Technologie, Transformation pflanzlicher Protoplasten, Expression von GFP (grün fluoreszierendes Protein) und GFP-Fusionsproteinen, in Hefe- und Pflanzenzellen, Expressionsanalyse von Reportergenen, Detektion von GFP im Fluoreszenzmikroskop
Max. Teilnehmerzahl: 20
Prüfungsmodalitäten: Protokoll über die Übung, mündliche oder schriftliche Prüfung direkt nach Beendigung der Übung

Im Rahmen des Praktikums sollen grundlegende molekularbiologische Techniken erlernt und selbständig durchgeführt werden. Die Durchführung erfolgt anhand ausgewählter Beispiele in unterschiedlichen Modellorganismen (E.coli, Hefe, Pflanzen).
Tecniken: Klonierung bestimmter Gene (inklusive PCR Amplifikation) und Expression in E. coli, Nachweis des Proteins mittels Westernblott Analyse. ncRNA, Northern Blot, Isolierung eines Genes, Markierung und Verwendung beim Southern Blot. Gene in Hefe- und Pflanzenexpressionsvektoren; Hefe-Zwei-Hybrid Technologie, Transformation pflanzlicher Protoplasten, Expression von GFP (grün fluoreszierendes Protein) und GFP-Fusionsproteinen, in Hefe- und Pflanzenzellen, Expressionsanalyse von Reportergenen, Detektion von GFP im Fluoreszenzmikroskop
Max. Teilnehmerzahl: 20
Prüfungsmodalitäten: Protokoll über die Übung, mündliche oder schriftliche Prüfung direkt nach Beendigung der Übung

Im Rahmen des Praktikums sollen grundlegende molekularbiologische Techniken erlernt und selbständig durchgeführt werden. Die Durchführung erfolgt anhand ausgewählter Beispiele in unterschiedlichen Modellorganismen (E.coli, Hefe, Pflanzen).
Tecniken: Klonierung bestimmter Gene (inklusive PCR Amplifikation) und Expression in E. coli, Nachweis des Proteins mittels Westernblott Analyse. ncRNA, Northern Blot, Isolierung eines Genes, Markierung und Verwendung beim Southern Blot. Gene in Hefe- und Pflanzenexpressionsvektoren; Hefe-Zwei-Hybrid Technologie, Transformation pflanzlicher Protoplasten, Expression von GFP (grün fluoreszierendes Protein) und GFP-Fusionsproteinen, in Hefe- und Pflanzenzellen, Expressionsanalyse von Reportergenen, Detektion von GFP im Fluoreszenzmikroskop
Max. Teilnehmerzahl: 20
Prüfungsmodalitäten: Protokoll über die Übung, mündliche oder schriftliche Prüfung direkt nach Beendigung der Übung

In diesem Kurs werden Studenten mit den neuesten RNA-Biochemie Techniken vertraut gemacht. Sie werden an kleinen Projekten arbeiten: i) Protein-unterstützte RNA Faltung in vivo; ii) Messung der Effekte von Ionenstärke und Temperatur auf die RNA Struktur; iii) Bestimmung der Affinität von RNA-Protein Interaktionen. Die Methoden beinhalten RNA Isolierung aus Zellen, Primer Extension, in vitro Transkription, Untersuchung der Effizienz der Ribozymkatalyse und native Gelelektrophorese (EMSA). Begleitet wird dieser Kurs von einem Seminar, in dem grundlegende Prinzipien von RNA Struktur, Faltung und Liganden-Interaktion (z.B: mit Metallionen, Protein) vermittelt werden. Außerdem soll der Lehrinhalt die Vielfältigkeit an biochemischen und biophysikalischen RNA Methoden darlegen.